如何用濾膜法測細菌總數(shù)-集菌儀

基于濾膜上細菌直接計數(shù)法的細菌總數(shù)快速檢測
【摘要】 細菌總數(shù)快速檢測在質(zhì)量監(jiān)測中具有重要的意義，目前除了經(jīng)典的平板培養(yǎng)法以外，還有微菌落法、阻抗法等快速檢測方法，這些方法或者需要較長的檢測時間，或者需要較高的檢測成本。本研究提出一種不需要培養(yǎng)而在濾膜上直接計數(shù)的細菌總數(shù)的快速檢測方法，它主要分為過濾、染色、顯微鏡計數(shù)和計算四個步驟。計算細菌總數(shù)時，根據(jù)細菌在濾膜上的分布特點，對傳統(tǒng)公式進行改進，提出按區(qū)域計算細菌總數(shù)的計算方法，提高了檢測精度。研究結(jié)果表明，該方法與傳統(tǒng)的平板培養(yǎng)法無顯著性差異（t=0.847，P=0.436＞0.05），是一種低成本、快速的細菌總數(shù)檢測方法。
1 引 言
細菌總數(shù)計數(shù)的研究已有很多，目前國標規(guī)定的方法為平板計數(shù)法，該方法是將樣品加入瓊脂營養(yǎng)基，在37 ℃下培養(yǎng)24～48 h后計數(shù)。這種方法精度高，但耗時長，難以滿足實際工作需要。為了簡化檢測程序、縮短檢測時間，國內(nèi)外學者進行了大量的快速檢測方法的研究，提出了阻抗檢測法〔1〕、Simplate TM全平器計數(shù)法〔2〕、微菌落技術(shù)〔3-5〕、紙片法〔6-7〕等檢測方法，取得了的成果，但檢測時間仍在4 h以上。
本研究在分析了已有研究成果的基礎上，提出了在濾膜上染色后，直接計數(shù)的細菌總數(shù)檢測方法，具體步驟為：用集菌儀進行細菌收集→在膜上進行染色→在油鏡下計數(shù)→按公式計算出菌液濃度。實驗結(jié)果表明，該方法與傳統(tǒng)的平板培養(yǎng)法無顯著性差異，檢測時間約1 h，是一種快速的細菌總數(shù)檢測方法。